RNA恒温扩增联合熔解曲线分析鉴定胞内分枝杆菌的应用研究

• 作者: 崔振玲 李园园 程松 胡忠义 陆俊梅
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: RNA恒温扩增 熔解曲线 胞内分枝杆菌
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 58-62
• 页数: 5页
• 分类号: R378
• 字数: 4291字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2014.01.013

摘要

目的 建立RNA恒温扩增联合熔解曲线分析技术(RIARD-MCA)鉴定胞内分枝杆菌的方法,评估其应用效果.方法 以胞内分枝杆菌的16S rRNA的特异序列为检测靶标设计RNA探针和带有T7启动子的逆转录扩增引物,42 ℃恒温扩增实时检测后进行熔解曲线分析,对21种分枝杆菌标准株、5种非分枝杆菌和229株分枝杆菌临床分离株进行鉴别检测;同时以16S rRNA及hsp65基因PCR测序结果为金标准对照.结果 RIARD-MCA在21种分枝杆菌标准株及5种非分枝杆菌检测中只有胞内分枝杆菌阳性,其他阴性,与测序结果一致;在分枝杆菌临床分离株检测中,鉴定胞内分枝杆菌63株,其余为非胞内分枝杆菌,PCR测序为胞内分枝杆菌63株,其余166株为非胞内分枝杆菌,其灵敏度为100%(63/63),特异度为100%(166/166).结论 RIARD-MCA鉴定胞内分枝杆菌具有较高的灵敏度、特异度和准确性,且检测快速,有望作为一种新的胞内分枝杆菌临床分离株鉴定方法.