牛病毒性腹泻病毒JL-1株E0基因的序列分析及其原核表达

• 作者: 张淑琴 李鹏 温永俊 高维凡
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 E0基因 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 页码范围: 356-361
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文

摘要

为研究牛病毒性腹泻病毒(BVDV) E0基因序列的保守性及其表达蛋白的抗原性,采用高保真酶从牛病毒性腹泻病毒JL-1株中扩增出完整的E0基因,将其测序结果与GenBank中公布的13株BVDV1型和2株BVDV 2型的E0基因序列进行同源性比较并绘制系统进化树.将JL-1株E0基因克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中以构建原核表达重组质粒pGEX-6P-E0,并转化至表达宿主菌BL21 (DE3) pLysS,经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE和Western-blot分析.结果显示,JL-1株E0基因与13株BVDV 1型的E0基因具有较高的同源性,介于75.3％～94.0％之间,而与2株BVDV 2型的E0基因序列的同源性较低.原核表达获得可溶性的E0融合蛋白大小约为50 ku.Western-blot分析结果显示,目的蛋白具有良好的反应原性.结果证实,牛病毒性腹泻病毒E0基因具有较高的保守性,其表达的蛋白具有较好的反应原性.