PEG介导的猴头菌遗传转化体系的建立

• 作者: 刘莉 尤琳烽 廖静文 林俊芳 肖招燕 郭丽琼
• 来源期刊: 菌物学报
• 关键词: 猴头菌 原生质体制备 PEG介导转化
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 121-128
• 语种: 中文
• DOI: 10.13346/j.mycosystema.120209

摘要

对猴头菌Hericium erinaceus原生质体制备的各种因素进行比较研究,结果表明,猴头菌原生质体制备的最佳体系为:液体培养5d的猴头菌丝,以0.6mol/L KCl作为稳渗剂,加入含1.0％纤维素酶+1.0％蜗牛酶+1.0％溶壁酶的复合酶,在30℃酶解猴头菌丝3h时,原生质体得率达到3.0x106个/mL.潮霉素敏感性测试表明,猴头菌在PDSA固体培养基上的潮霉素最低筛选浓度为60μg/mL.采用PEG介导的原生质体法,将质粒pBgGI-hph(含有灵芝gpd1-GI启动子和潮霉素抗性基因hph)转化猴头菌原生质体,经潮霉素初步筛选以及PCR鉴定,表明有4株猴头菌拟转化子的基因组扩增出hph基因;转化子经过多次转接后进行Southern杂交验证,结果表明4个转化子的基因组中均稳定整合了hph抗性基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林俊芳	华南农业大学食品学院	95	904	18.0	26.0
5	郭丽琼	华南农业大学食品学院	94	847	17.0	26.0
9	刘莉	华南农业大学食品学院	3	18	2.0	3.0
10	尤琳烽	华南农业大学食品学院	4	27	2.0	4.0
11	肖招燕	华南农业大学食品学院	2	18	2.0	2.0
12	廖静文	华南农业大学食品学院	1	16	1.0	1.0