利用锌指核酸酶(ZFN)技术介导敲除猪卵母细胞孤雌胚胎中肌肉生长抑制素基因(MSTN)的初步研究

• 作者: 刘杰 崔文涛 李奎 高鹏飞
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 锌指核酸酶技术 肌肉生长抑制素基因 显微注射 猪卵母细胞孤雌胚胎
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 464-469
• 页数: 6页
• 字数: 4641字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2014.04.009

摘要

肌肉生长抑制素基因(myostatin,MSTN)是转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β)超家族的一员,具有特异性调控动物肌肉生长的功能.为证明锌指核酸酶(zinc-finger nucleases,ZFN)修饰技术在猪(Sus scrofa)胚胎水平上对MSTN基因修饰的效率,筛选高效的作用靶点,本研究通过构建针对MSTN基因特异位点的ZFN质粒,采用显微注射方法,将其注射进入猪卵母细胞孤雌胚胎细胞,采用PCR对培养后的囊胚进行MSTN基因的扩增检测,并对其进行序列测定比较分析.研究结果表明,373枚注射囊胚基因组经MSTN引物特异性扩增并测序,检测到2枚发生突变,均在ZFN靶位点处,第39号囊胚发生14个碱基的单碱基突变,第321号囊胚发生11个碱基的单碱基突变,ZFN介导的打靶效率为0.54％.本研究进一步验证了ZFN基因编辑技术在敲除猪MSTN基因上应用的可行性,为MSTN基因敲除猪的制备提供了依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李奎	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	73	382	11.0	16.0
2	刘杰	青岛科技大学生物工程与技术系	42	284	9.0	15.0
3	崔文涛	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	14	66	6.0	7.0
4	高鹏飞	青岛科技大学生物工程与技术系	6	16	3.0	3.0