DNA甲基化敏感位点(CCGG)文库克隆载体的构建

• 作者: 张梅 徐艳 满红涛 郑可欣 马世良
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: DNA甲基化 CCGG位点 甲基化文库 HpaⅡ/Msp Ⅰ酶切体系
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-10
• 页数: 7页
• 分类号: Q291
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2014.04.0076

摘要

目的:旨在建立一种简便易行的DNA甲基化文库构建载体,用于筛选细胞中具有甲基化敏感性CCGG位点的DNA片段.方法:根据HpaⅡ/MspⅠ酶切体系对甲基化酶敏感性不同的特点,通过在PCR引物中添加CCGG酶切位点的方法,将扩增得到的目的片段连接到无CpG甲基化的质粒载体上.结果:成功构建了含双CCGG位点的pCpGfree-HpaⅡ/MspⅠ-1质粒载体.结论:所构建的pCpGfree-HpaⅡ/Msp Ⅰ-1质粒载体CCGG位点未发生甲基化,故可以用于构建含有甲基化CCGG序列的DNA甲基化文库.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐艳		29	231	10.0	14.0
2	张梅		15	40	4.0	6.0
3	马世良		12	35	4.0	5.0
4	满红涛		2	1	1.0	1.0
5	郑可欣		2	6	1.0	2.0