原文服务方: 中国兽医杂志       
摘要:
分别以pEGFP-Mito和pAN4质粒为模板,扩增出MTS-EGFP和EcoR Ⅰ基因片段,利用快速体外基因重组技术-重组PCR,将两者连接得到MTS-EGFP-EcoR Ⅰ片段,构建克隆载体pTRE2hyg-EE,经Age Ⅰ和Not Ⅰ双酶切得到MTS-EG-FP-EcoR Ⅰ融合基因产物,连接克隆于真核表达质粒pEGFP-Mito后获得pMDD-Z质粒.琼脂糖凝胶电泳结果显示,MTS-EGFP和EcoR Ⅰ基因片段大小分别是831 bp和860 bp.测序结果显示,插入pTRE2hyg-EE克隆载体中的MTS-EGFP-EcoR Ⅰ片段大小1 672 bp,且基因序列正确,没发生点突变.琼脂糖凝胶电泳结果显示,pMDD-Z质粒的双酶切产物分别为1 587 bp的插入片段和4 024 bp的载体片段.测序结果显示,pMDD-Z质粒中含1 659 bp的开放阅读框,编码553个氨基酸,从N端至C端,分别为线粒体信号导肽、绿色荧光蛋白和限制性内切酶EcoR Ⅰ,且未发生移码突变.
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关键词云
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文献信息
篇名 线粒体DNA缺失质粒pMDD-Z的构建及鉴定
来源期刊 中国兽医杂志 学科
关键词 线粒体DNA Rho0细胞 克隆 重组PCR 质粒构建
年,卷(期) 2014,(1) 所属期刊栏目 调查研究
研究方向 页码范围 14-17
页数 4页 分类号 S852.23
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张婷 中国科学院北京基因组研究所 55 447 13.0 20.0
2 汤树生 中国农业大学动物医学院国家兽药安全评价中心 33 144 7.0 10.0
3 靳溪 北京师范大学生命科学学院 13 32 4.0 5.0
4 张朝明 中国农业大学动物医学院国家兽药安全评价中心 6 20 4.0 4.0
5 赵文霞 中国农业大学动物医学院国家兽药安全评价中心 2 5 1.0 2.0
6 刘凤英 中国农业大学动物医学院国家兽药安全评价中心 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
线粒体DNA
Rho0细胞
克隆
重组PCR
质粒构建
研究起点
研究来源
研究分支
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期刊影响力
中国兽医杂志
月刊
0529-6005
11-2471/S
大16开
1953-01-01
chi
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