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线粒体DNA缺失质粒pMDD-Z的构建及鉴定
线粒体DNA缺失质粒pMDD-Z的构建及鉴定
作者:
刘凤英
张婷
张朝明
汤树生
肖希龙
赵文霞
靳溪
原文服务方:
中国兽医杂志
线粒体DNA
Rho0细胞
克隆
重组PCR
质粒构建
摘要:
分别以pEGFP-Mito和pAN4质粒为模板,扩增出MTS-EGFP和EcoR Ⅰ基因片段,利用快速体外基因重组技术-重组PCR,将两者连接得到MTS-EGFP-EcoR Ⅰ片段,构建克隆载体pTRE2hyg-EE,经Age Ⅰ和Not Ⅰ双酶切得到MTS-EG-FP-EcoR Ⅰ融合基因产物,连接克隆于真核表达质粒pEGFP-Mito后获得pMDD-Z质粒.琼脂糖凝胶电泳结果显示,MTS-EGFP和EcoR Ⅰ基因片段大小分别是831 bp和860 bp.测序结果显示,插入pTRE2hyg-EE克隆载体中的MTS-EGFP-EcoR Ⅰ片段大小1 672 bp,且基因序列正确,没发生点突变.琼脂糖凝胶电泳结果显示,pMDD-Z质粒的双酶切产物分别为1 587 bp的插入片段和4 024 bp的载体片段.测序结果显示,pMDD-Z质粒中含1 659 bp的开放阅读框,编码553个氨基酸,从N端至C端,分别为线粒体信号导肽、绿色荧光蛋白和限制性内切酶EcoR Ⅰ,且未发生移码突变.
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文献信息
篇名
线粒体DNA缺失质粒pMDD-Z的构建及鉴定
来源期刊
中国兽医杂志
学科
关键词
线粒体DNA
Rho0细胞
克隆
重组PCR
质粒构建
年,卷(期)
2014,(1)
所属期刊栏目
调查研究
研究方向
页码范围
14-17
页数
4页
分类号
S852.23
字数
语种
中文
DOI
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
张婷
中国科学院北京基因组研究所
55
447
13.0
20.0
2
汤树生
中国农业大学动物医学院国家兽药安全评价中心
33
144
7.0
10.0
3
靳溪
北京师范大学生命科学学院
13
32
4.0
5.0
4
张朝明
中国农业大学动物医学院国家兽药安全评价中心
6
20
4.0
4.0
5
赵文霞
中国农业大学动物医学院国家兽药安全评价中心
2
5
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6
刘凤英
中国农业大学动物医学院国家兽药安全评价中心
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研究来源
研究分支
研究去脉
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期刊影响力
中国兽医杂志
主办单位:
中国畜牧兽医学会
出版周期:
月刊
ISSN:
0529-6005
CN:
11-2471/S
开本:
大16开
出版地:
邮发代号:
创刊时间:
1953-01-01
语种:
chi
出版文献量(篇)
12894
总下载数(次)
0
总被引数(次)
54031
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