PMI基因作为选择标记的植物表达载体构建及转化白花丹参体系的建立

• 作者: 史仁玖 张友灿 方茜 李艳玲 郝岗平 陶如 黄璐琦
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 6-磷酸甘露糖异构酶(PMI)基因 甘露糖 白花丹参 转基因筛选标记
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 资源与鉴定
• 页码范围: 1209-1213
• 语种: 中文
• DOI: 10.4268/cjcmm20140712

摘要

目的:构建含有大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶(6-phosphomannose isomerase,PMI)基因并替换潮霉素抗性(hygromycin,hyg)基因的植物表达载体pCAMBIA1305-PMI,同时建立以PMI/甘露糖为筛选标记的白花丹参转基因体系.方法:首先从大肠杆菌Escherichia coli DH5α中克隆PMI基因,然后以PMI基因替换植物表达载体pCAMBIA1305中的hyg基因,构建了以PMI基因为选择标记基因的植物表达载体pCAMBIA1305-PMI,并用电击转化方法导入根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens LBA4404中,用叶片浸染法转化白花丹参.结果:在白花丹参MS +6-BA 1.5 mg·L-1 +NAA0.1mg·L-1固体分化培养基中附加20 g·L-1-甘露糖和10g·L-1蔗糖为碳源的选择压力下,pCAMBIA1305-PMI的转化率为23.7％,对再生植株用PCR检测证实了PMI基因的导入.结论:建立了以PMI-甘露糖为选择系统的白花丹参转基因体系,可应用于后续目的基因的转化奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄璐琦	中国中医科学院中药资源中心	500	10193	46.0	73.0
2	史仁玖	泰山医学院基础医学院	33	327	9.0	16.0
3	郝岗平	泰山医学院基础医学院	30	280	8.0	15.0
5	陶如	泰山医学院基础医学院	12	14	2.0	3.0
6	张友灿		6	56	4.0	6.0
7	李艳玲	泰山医学院基础医学院	34	276	7.0	15.0
8	方茜	泰山医学院基础医学院	12	24	2.0	4.0