SSH技术筛选家蝇抗感染差异基因

• 作者: 朱家勇 王艳 金小宝
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 家蝇 抗感染免疫 抑制性消减杂交 实时定量荧光PCR
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 499-506
• 页数: 8页
• 分类号: R374
• 字数: 996字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2014.05.014

摘要

目的 为了解家蝇抗菌分子免疫机制及效应免疫分子的表达情况,运用ssh、real-time PCR,构建家蝇差异表达消减文库.方法 以金黄色葡萄球菌(S.aureus)、大肠杆菌(E.coli)和球孢白僵菌(Beauvoir bassinet bacteria),感染家蝇幼虫构建金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和球孢白僵菌感染的差减文库,成功构建了家蝇抗感染差异表达cDNA文库.结果 文库的阳性克隆进行PCR鉴定主要分布在250～750 bp之间,随机挑取252个白斑进行测序和同源性分析,应用反向Northern斑点杂交技术鉴定了35个基因,其中32个为真阳性,包括抗菌肽、酶、核糖体蛋白,以及一些功能不明的蛋白.结论 运用real-time PCR技术分析了三种蛋白基因的表达情况,结果显示诱导后不同时间点,不同发育阶段抗菌肽均普遍表达,但表达水平存在着明显的差异,诱导后表达明显升高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱家勇	广东药学院药物活性物质省级重点实验室	121	797	13.0	22.0
2	金小宝	广东药学院药物活性物质省级重点实验室	100	490	12.0	15.0
3	王艳	广东药学院医药化工学院	21	146	8.0	11.0