编码缺刻缘绿藻乙酰辅酶A羧化酶BCCP亚基的基因克隆与表达分析

• 作者: 周志刚 李燕
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 缺刻缘绿藻 乙酰辅酶A羧化酶 生物素羧基载体蛋白(BCCP) 氮饥饿 半定量反转录PCR
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 794-802
• 分类号: Q785|S917.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49124

摘要

为了探讨在氮饥饿对缺刻缘绿藻花生四烯酸(ArA)合成与积累的影响,通过cDNA末端快速扩增(RACE)和设计简并引物进行反转录(RT)-PCR扩增,克隆了编码该藻异质型乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)的2个生物素羧基载体蛋白(BCCP)的基因序列.其中MiBCCP1基因的cDNA序列长1 267 bp,包含的5 '-非翻译区(UTR)长44 bp,3’-UTR长524 bp,开放阅读框(ORF)长699 bp,编码232个氨基酸并含有45个氨基酸序列的叶绿体定位信号肽;预测成熟蛋白分子量约为20 ku.MiBCCP2基因的ORF长789 bp,编码263个氨基酸并含有49个氨基酸的叶绿体定位信号肽,推测成熟蛋白分子量约为22 ku,但其羧基端缺乏生物素酰基化位点.邻接法(NJ)构建的聚类图显示它们分属于2个不同的分支(靴带值为100).采用半定量反转录(RT)-PCR技术分析这2个基因的表达量,结果显示,在氮饥饿光照培养条件下,它们的相对转录量都先短暂升高然后持续下调,从而表明缺刻缘绿藻脂肪酸的从头合成能力有下降的趋势.结合该藻的ArA含量在该培养条件下明显增加的结果,推测胞质中同质型ACCase对缺刻缘绿藻ArA合成与积累起着更重要的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李燕	上海海洋大学水产与生命学院	55	389	11.0	17.0
2	周志刚	上海海洋大学水产与生命学院	25	123	5.0	10.0