套式聚合酶链式反应诊断三日疟原虫感染的临床应用

• 作者: 孔祥礼 张本光 徐超 李瑾 王用斌 肖婷 赵长磊 魏庆宽 魏艳彬 黄炳成
• 来源期刊: 中华诊断学电子杂志
• 关键词: 疟原虫,三日 核糖体亚单位 RNA,核糖体 聚合酶链式反应,套式 诊断
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 270-274
• 页数: 5页
• 字数: 3728字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-655X.2014.04.007

摘要

目的：应用套式聚合酶链式反应（PCR）扩增小亚单位核糖体核糖核酸（SSUrRNA）基因诊断三日疟原虫感染，以减少三日疟的漏诊和误诊。方法分别提取可疑三日疟患者抗凝血 DNA和对照间日疟、恶性疟患者抗凝血 DNA，以此为模板，用疟原虫属特异性引物进行第一轮扩增；然后以第一轮扩增产物为模板，用4种疟疾的种特异性引物进行第二轮扩增，比较扩增出的18 SSU rRNA基因片段的大小，并对目的片段进行测序鉴定。结果经属特异性引物 PCR 扩增后，3个样本均出现大小约为1200bp 的条带。经种特异性引物 PCR 扩增后，间日疟及恶性疟确诊样本均扩增出相应的120bp 和205bp 特异性条带；可疑患者样本仅在用三日疟原虫种特异性作引物时扩增出144bp 特异条带，与理论值相符，与 Genbank 标准序列对比显示，扩增片段大小及测序结果均完全正确。证实患者感染三日疟原虫。结论利用小亚单位核糖体核糖核酸基因片段三日疟种特异引物进行扩增可以用于诊断三日疟原虫感染。