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摘要:
[目的]本研究旨在克隆来自北极海洋、具有合成卤化物潜力的链霉菌(Streptomyces sp.)604F中的一个卤化酶基因,为后续克隆卤化物合成基因簇、分离鉴定卤化物提供指导.[方法]利用琼脂块法初步测试抗菌活性,借助液相色谱-飞行时间串联质谱技术(LC-Tof MS)初步寻找Streptomyces sp.604F发酵粗提液中的卤化物,并以简并PCR扩增合成次级代谢产物的指示基因(Ⅰ型、Ⅱ型聚酮合酶及非核糖体多肽合成酶编码基因);根据依赖黄素腺嘌呤二核苷酸的卤化酶基因保守区设计的简并引物,扩增基因片段并测序分析;采用高效热不对称交错PCR (hiTAIL-PCR)技术扩增卤化酶基因全长.[结果]Streptomyces sp.604F具有较强的抗白色念珠菌活性,其基因组同时含有编码Ⅰ型聚酮合酶、Ⅱ型聚酮合酶和非核糖体多肽合成酶基因,以及卤化酶基因;通过染色体步移克隆该卤化酶基因全长,共1443 bp,编码一个新的非色氨酸卤化酶,在合成已知卤化物的卤化酶数据库中,与其同源关系最近的为一类参与合成糖肽类次级代谢产物的卤化酶.[结论]Streptomyces sp.604F具有新的非色氨酸卤化酶,且推测参与糖肽类化合物的卤化修饰,为后续寻找目的卤化物提供了指导,也为研究该合成基因簇奠定基础.
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内容分析
关键词云
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文献信息
篇名 北极海洋链霉菌604F的卤化酶基因克隆及特征
来源期刊 微生物学报 学科 生物学
关键词 卤化酶 放线菌 北极
年,卷(期) 2014,(6) 所属期刊栏目 研究简报
研究方向 页码范围 703-712
页数 分类号 Q814
字数 语种 中文
DOI 10.13343/j.cnki.wsxb.2014.06.014
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 陈波 华东理工大学生物工程学院 37 668 14.0 24.0
3 张晓华 中国海洋大学海洋生命学院 59 630 15.0 23.0
6 廖丽 中国极地研究中心国家海洋局极地科学重点实验室 4 13 2.0 3.0
7 陈瑞勤 华东理工大学生物工程学院 1 10 1.0 1.0
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放线菌
北极
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微生物学报
月刊
0001-6209
11-1995/Q
大16开
北京朝阳区北辰西路1号中科院微生物所内
2-504
1953
chi
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15
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53416
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