ARRB1融合蛋白表达载体ARRB1-EGFP的构建及其在神经胶质瘤细胞中的表达

• 作者: 文普帅 高静
• 来源期刊: 解放军医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: ARRB1蛋白 载体构建 表达 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1059-1062
• 页数: 4页
• 分类号: R34
• 字数: 2457字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-5227.2014.10.023

摘要

目的 构建重组表达载体ARRB1-EGFP,在细胞中表达与鉴定,为进一步研究其功能奠定基础.方法 RT-PCR获得编码人ARRB1的全基因序列,克隆到真核表达载体pEGFPN1,构建重组表达载体ARRB1-EGFP,并转化于E.coli DH5 α中筛选阳性重组子,通过限制性内切酶酶切电泳鉴定和DNA序列测定正确后,转染人HEK293细胞中表达,表达产物经Western blot检测蛋白的特异性,应用免疫荧光方法比较融合蛋白与内源性ARRB1在SNB19细胞的定位.结果 成功构建了ARRB1融合蛋白的真核表达载体,并经Western blot鉴定正确.免疫荧光提示融合蛋白与内源性ARRB1定位相似.结论 ARRB1-EGFP融合蛋白可以安全、高效地转导入HEK293以及SNB19细胞中.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	文普帅	辽宁医学院病理生理学教研室	12	45	4.0	6.0
2	高静	辽宁医学院附属第一医院超声科	20	58	5.0	6.0