辣椒疫霉elicitins基因的克隆及瞬时表达分析

• 作者: 吴琦 孙华伟 张孝然 徐敬友 李强楷 童蕴慧 贾祖群 邢玉平 邹金城
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 辣椒疫霉 elicitin 瞬时表达 植物抗病性
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 28-36
• 分类号: S668.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.7685/j.issn.1000-2030.2014.06.005

摘要

通过挖掘辣椒疫霉中的外泌蛋白激发子elicitins的基因序列,分析其转录特征,克隆基因序列并进行瞬时表达,以阐明其在辣椒疫霉生长发育和侵染过程中的作用.本研究利用转录组测序结果和致病疫霉INF1序列作为比对序列,对辣椒疫霉基因组数据库进行elicitins序列挖掘.采用RT-PCR方法分析elicitins基因在辣椒疫霉生长发育(菌丝、游动孢子囊、游动孢子、萌发的休止孢)和侵染寄主阶段(本氏烟灌根1.5、3、6、12、24、36和72 h后)的转录水平.克隆elicitins基因序列,并与其他卵菌的elicitins进行序列比对,分析进化关系.在本氏烟上进行elicitins的瞬时表达分析.结果表明:经生物信息学分析获得14个含有信号肽编码序列的elicitins基因全长序列.新发现6个elicitins基因在辣椒疫霉生长发育和侵染寄主阶段差异表达.对这6个和之前报道的5个elicitins基因进行全长克隆,能够克隆出的10个elicitins都属于酸性elicitins,聚类分析可将其分在第一和第三聚类组.异源表达发现2个elicitins能够激发本氏烟产生过敏反应.本研究结果不仅为阐明elicitins在辣椒疫霉生长发育和侵染寄主过程中的作用提供了重要数据,也为植物抗疫病的基因工程提供了科学依据.