辣椒疫霉(Phytophthora capsici)果胶甲基酯酶Pcpme3基因真核表达及功能研究

• 作者: 付红波 冯宝珍 张修国 李培谦 贾永健
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 辣椒疫霉 果胶甲基酯酶 真核表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 1988-1993
• 页数: 6页
• 分类号: S4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.06.014

摘要

[目的]对辣椒疫霉果胶甲基酯酶Pcpme3基因进行真核表达,制备其特异性抗血清,为用Western blot检测该基因在辣椒疫霉致病过程中的功能奠定基础.[方法]利用TR-PCR分离鉴定Pcpme3的成熟肽片段,克隆于pPIC9K载体.将获得的表达载体转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析和免疫家兔制备特异性抗体.[结果]酵母转化子经MD、MM平板筛选和G418抗生素筛选与PCR鉴定,获得Mut+/His+表型高拷贝重组转化子,经1%甲醇诱导后,SDS-PAGE检测发酵上清液,检测出43 kD的特异蛋白.重组蛋白免疫家兔制备特异抗血清,Western blot检测该基因在游动孢子侵染辣椒叶片中的表达,随着病情加重,该基因的表达逐渐增强,从而证明该基因参与了病菌的侵染致病过程.[结论]利用真核表达获得的蛋白制成特异性抗体可以有效地检测Pcpme3在辣椒疫霉侵染寄主过程中的功能特性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张修国	山东农业大学植物保护学院	56	500	13.0	20.0
2	付红波		13	67	5.0	8.0
3	贾永健	山东农业大学植物保护学院	2	47	2.0	2.0
4	冯宝珍	山东农业大学植物保护学院	1	2	1.0	1.0
5	李培谦	山东农业大学植物保护学院	1	2	1.0	1.0