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摘要:
[目的]对辣椒疫霉果胶甲基酯酶Pcpme3基因进行真核表达,制备其特异性抗血清,为用Western blot检测该基因在辣椒疫霉致病过程中的功能奠定基础.[方法]利用TR-PCR分离鉴定Pcpme3的成熟肽片段,克隆于pPIC9K载体.将获得的表达载体转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析和免疫家兔制备特异性抗体.[结果]酵母转化子经MD、MM平板筛选和G418抗生素筛选与PCR鉴定,获得Mut+/His+表型高拷贝重组转化子,经1%甲醇诱导后,SDS-PAGE检测发酵上清液,检测出43 kD的特异蛋白.重组蛋白免疫家兔制备特异抗血清,Western blot检测该基因在游动孢子侵染辣椒叶片中的表达,随着病情加重,该基因的表达逐渐增强,从而证明该基因参与了病菌的侵染致病过程.[结论]利用真核表达获得的蛋白制成特异性抗体可以有效地检测Pcpme3在辣椒疫霉侵染寄主过程中的功能特性.
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文献信息
篇名 辣椒疫霉(Phytophthora capsici)果胶甲基酯酶Pcpme3基因真核表达及功能研究
来源期刊 中国农业科学 学科 农学
关键词 辣椒疫霉 果胶甲基酯酶 真核表达 抗血清
年,卷(期) 2009,(6) 所属期刊栏目 植物保护
研究方向 页码范围 1988-1993
页数 6页 分类号 S4
字数 语种 中文
DOI 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.06.014
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张修国 山东农业大学植物保护学院 56 500 13.0 20.0
2 付红波 13 67 5.0 8.0
3 贾永健 山东农业大学植物保护学院 2 47 2.0 2.0
4 冯宝珍 山东农业大学植物保护学院 1 2 1.0 1.0
5 李培谦 山东农业大学植物保护学院 1 2 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
辣椒疫霉
果胶甲基酯酶
真核表达
抗血清
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国农业科学
半月刊
0578-1752
11-1328/S
大16开
北京中关村南大街12号
2-138
1960
chi
出版文献量(篇)
9193
总下载数(次)
12
相关基金
国家高技术研究发展计划(863计划)
英文译名:The National High Technology Research and Development Program of China
官方网址:http://www.863.org.cn
项目类型:重点项目
学科类型:信息技术
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