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辣椒疫霉(Phytophthora capsici)果胶甲基酯酶Pcpme3基因真核表达及功能研究
辣椒疫霉(Phytophthora capsici)果胶甲基酯酶Pcpme3基因真核表达及功能研究
作者:
付红波
冯宝珍
张修国
李培谦
贾永健
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
辣椒疫霉
果胶甲基酯酶
真核表达
抗血清
摘要:
[目的]对辣椒疫霉果胶甲基酯酶Pcpme3基因进行真核表达,制备其特异性抗血清,为用Western blot检测该基因在辣椒疫霉致病过程中的功能奠定基础.[方法]利用TR-PCR分离鉴定Pcpme3的成熟肽片段,克隆于pPIC9K载体.将获得的表达载体转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析和免疫家兔制备特异性抗体.[结果]酵母转化子经MD、MM平板筛选和G418抗生素筛选与PCR鉴定,获得Mut+/His+表型高拷贝重组转化子,经1%甲醇诱导后,SDS-PAGE检测发酵上清液,检测出43 kD的特异蛋白.重组蛋白免疫家兔制备特异抗血清,Western blot检测该基因在游动孢子侵染辣椒叶片中的表达,随着病情加重,该基因的表达逐渐增强,从而证明该基因参与了病菌的侵染致病过程.[结论]利用真核表达获得的蛋白制成特异性抗体可以有效地检测Pcpme3在辣椒疫霉侵染寄主过程中的功能特性.
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文献信息
篇名
辣椒疫霉(Phytophthora capsici)果胶甲基酯酶Pcpme3基因真核表达及功能研究
来源期刊
中国农业科学
学科
农学
关键词
辣椒疫霉
果胶甲基酯酶
真核表达
抗血清
年,卷(期)
2009,(6)
所属期刊栏目
植物保护
研究方向
页码范围
1988-1993
页数
6页
分类号
S4
字数
语种
中文
DOI
10.3864/j.issn.0578-1752.2009.06.014
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
张修国
山东农业大学植物保护学院
56
500
13.0
20.0
2
付红波
13
67
5.0
8.0
3
贾永健
山东农业大学植物保护学院
2
47
2.0
2.0
4
冯宝珍
山东农业大学植物保护学院
1
2
1.0
1.0
5
李培谦
山东农业大学植物保护学院
1
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二级引证文献(0)
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引证文献(0)
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引证文献(0)
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二级引证文献(2)
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引证文献(0)
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研究主题发展历程
节点文献
辣椒疫霉
果胶甲基酯酶
真核表达
抗血清
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国农业科学
主办单位:
中国农业科学院
出版周期:
半月刊
ISSN:
0578-1752
CN:
11-1328/S
开本:
大16开
出版地:
北京中关村南大街12号
邮发代号:
2-138
创刊时间:
1960
语种:
chi
出版文献量(篇)
9193
总下载数(次)
12
相关基金
国家高技术研究发展计划(863计划)
英文译名:
The National High Technology Research and Development Program of China
官方网址:
http://www.863.org.cn
项目类型:
重点项目
学科类型:
信息技术
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