先天性长QT综合征相关人类HERG基因真核表达载体的构建及其功能表达

• 作者: 崔长琮 廉姜芳 李宇 薛小临 赵永辉
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 先天性长QT综合征 HERG基因 真核表达载体 功能表达
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 344-348
• 页数: 5页
• 分类号: R541.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2006.04.009

摘要

目的 构建先天性长QT综合征相关HERG基因的真核表达载体,观察其在真核细胞中的表达,建立稳定的细胞系,探讨基因的功能.方法 原核克隆载体pGEM-HERG经限制性内切酶获得HERG cDNA,将HERG cDNA亚克隆到真核表达载体pcDNA3中,用Lipofectamin2000转染试剂介导将pcDNA3-HERG及荧光真核表达载体pRK5-GFP共转染至HEK-293细胞,利用G-418进行细胞筛选,并用稀释法建立稳定的HEK-HERG细胞系.用全细胞膜片钳技术检测HERG基因的功能表达情况.结果 在原核克隆载体pGEM-HERG的基础上构建了HERG的真核表达载体pcDNA3-HERG,并使其在HEK-293细胞中成功表达,建立的HEK-HERG细胞系稳定传代.膜片钳技术检测到了HERG通道电流的表达.结论 该方法可成功构建及表达HERG的真核表达载体,为今后突变型HERG的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔长琮	西安交通大学医学院第一附属医院心血管内科	180	1117	16.0	22.0
2	赵永辉	西安交通大学医学院第一附属医院心血管内科	12	59	4.0	7.0
3	薛小临	西安交通大学医学院第一附属医院心血管内科	51	254	9.0	14.0
4	廉姜芳	西安交通大学医学院第一附属医院心血管内科	17	74	5.0	7.0
5	李宇	西安交通大学医学院第一附属医院心血管内科	55	264	8.0	14.0