靶向hTERT的RNAi载体的构建及其对大肠癌SW-480细胞增殖的影响

• 作者: 孙彦 孟永亮
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 大肠癌 RNA干扰 人端粒酶逆转录酶 SW-480细胞 增殖
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 423-427
• 分类号: R735.3|R730.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2014.04.012

摘要

目的:构建靶向人大肠癌细胞端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因的RNAi载体,探讨其对人大肠癌SW480细胞增殖的影响.方法:设计3条靶向hTERT的shRNA序列和阴性对照序列,分别克隆入pGPU6/GFP/Neo载体,构建RNAi载体pGPU6-hTERT-1、2、3和阴性对照载体pGPU6-hTERT-NC,转染SW480细胞.RT-PCR检测各组载体对hTERT mRNA表达的影响,MTT法检测下调hTERT mRNA表达对SW480细胞增殖的影响.结果:成功构建3个携带hTERT mRNA序列的重组载体,3种RNAi载体均能明显抑制SW480细胞hTERT mRNA的表达,pGPU6-hTERT-3组SW480细胞hTERT mRNA表达水平较空白对照组下调最为显著(0.347±0.028 vs 0.513±0.032,P＜0.01).转染3种RNAi载体均能明显抑制SW480细胞增殖,pGPU6-hTERT-3组细胞增殖抑制率较空白对照组、脂质体对照组和pGPU6-hTERT-NC组升高最为显著[(50.08±0.43)％ vs (4.11 ±0.39)％、(3.88±0.35)％、(3.38±0.35)％,P＜0.05].结论:转染RNAi载体pGPU6-hTERT-3能够抑制SW480细胞的增殖,其机制可能与降低hTERT基因的表达从而抑制端粒酶活性有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孟永亮	山东万杰医学院医学系内科学教研室	9	5	1.0	1.0
2	孙彦	山东万杰医学院医学系内科学教研室	8	7	2.0	2.0