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摘要:
目的 克隆罗汉果甘油酸-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH,EC 1.2.1.12)基因,分析其在基因表达定量研究中其作为内部参照基因的可行性.方法 采用同源克隆和cDNA末端快速克隆技术,以罗汉果cDNA为模板扩增GAPDH基因的保守区片段.结果 获得了罗汉果GAPDH保守区序列cDNA,命名为SgGAPDH(GenBank注册号:KC410810),序列长度为627 bp,编码209个氨基酸的多肽.系统发育分析表明,SgGAPDH属于植物甘油酸-3-磷酸脱氢酶家族.半定量PCR分析表明罗汉果GAPDH基因在不同组织中表达很稳定.以其作为内部参照基因,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)研究了异戊烯基焦磷酸异构酶(Isopentenyl-diphosphate delta isomerase)的组织表达规律.结果显示SgGAPDH具有良好的扩增效果和重现性.结论 首次克隆了罗汉果GAPDH基因,明确了该序列在基因表达分析中的内参照作用,为罗汉果甜苷生物合成基因的研究提供了条件.
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文献信息
篇名 罗汉果GAPDH基因的克隆及其在基因表达分析中的应用
来源期刊 时珍国医国药 学科 医学
关键词 罗汉果 甘油酸-3-磷酸脱氢酶 内参基因 实时荧光定量PCR
年,卷(期) 2014,(2) 所属期刊栏目 中医现代研究
研究方向 页码范围 495-498
页数 4页 分类号 R2-031
字数 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1008-0805.2014.02.107
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研究主题发展历程
节点文献
罗汉果
甘油酸-3-磷酸脱氢酶
内参基因
实时荧光定量PCR
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
时珍国医国药
月刊
1008-0805
42-1436/R
大16开
湖北省黄石市黄石大道874号
38-168
1990
chi
出版文献量(篇)
28395
总下载数(次)
43
总被引数(次)
203860
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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