不同浓度dbcAMP对SH-SY5Y细胞向γ-氨基丁酸能神经元分化潜能的影响

• 作者: 于升 吴江 周莉 王登莉 赵慧
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 双丁酰环磷腺苷 人神经母细胞瘤细胞 诱导 分化
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 933-937
• 页数: 5页
• 分类号: R741
• 字数: 3711字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20140505

摘要

目的：建立具有分化成γ-氨基丁酸能神经元潜能的神经干细胞模型，为γ-氨基丁酸能神经元退行性疾病的研究提供适宜的研究载体。方法：应用双丁酰环腺苷酸（dbcAMP）诱导人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y细胞），分为0 mmol·L-1 dbcAMP组（对照组）和0.3、0.6、1.0及2.0 dbcAMP组，观察诱导后各组 SH-SY5Y细胞的形态变化；采用 Imge-Pro Plus 5.0软件测量神经元样细胞神经突起长度，计算神经突起＞30μm细胞所占细胞总数的百分率；采用免疫荧光细胞化学技术检测γ-氨基丁酸能神经元标志性蛋白---谷氨酸脱羧酶65（GAD65）的表达，并计算其免疫反应阳性率。结果：形态学观察，对照组 SH-SY5Y细胞呈多边形、圆形或梭型，胞膜光滑，边界清晰；各浓度 dbcAMP组随着 dbcAMP浓度的增加和诱导时间的延长，SH-SY5Y细胞胞体变小、突起变长；1.0 mmol·L-1 dbcAMP组细胞互相交织，表现出成熟神经元的表型。SH-SY5Y细胞诱导培养72 h后，与对照组（31.4％±4.2％）比较，0.3、0.6、1.0和2.0 dbcAMP组神经突起＞30μm细胞所占细胞总数的百分率（40.1％±5.7％、47.5％±6.2％、73.1％±3.2％和74.3％±6.1％）明显升高（P＜0.05或P＜0.01）。SH-SY5Y细胞诱导培养72 h 后，与对照组（10.2％±2.1％）比较，0.3、0.6、1.0和2.0 dbcAMP 组GAD65阳性细胞表达率（22.1％±2.4％、46.9％±3.2％、70.7％±3.4％和72.3％±3.7％）明显升高（P＜0.05或P＜0.01）。结论：SH-SY5Y细胞具有分化为γ-氨基丁酸能神经元样细胞的潜能，1.0 mmol·L-1是 dbcAMP的最佳诱导浓度。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵慧	吉林大学基础医学院组织学与胚胎学系	44	181	7.0	11.0
2	周莉	吉林大学基础医学院组织学与胚胎学系	74	358	10.0	16.0
3	吴江	吉林大学第一医院神经内科	157	910	16.0	22.0
4	王登莉	吉林大学基础医学院组织学与胚胎学系	5	6	1.0	2.0
5	于升	吉林大学基础医学院组织学与胚胎学系	1	0	0.0	0.0