超滤截留狂犬疫苗残留DNA的工艺优化和机制探讨

• 作者: 刘子维 刘忱 张珩 熊欢 王凯 赵伟 郭举
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 工学
• 关键词: Vero细胞 DNA残留 超滤 鱼精蛋白
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 968-971
• 页数: 4页
• 分类号: TQ936
• 字数: 2437字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2014.12.012

摘要

目的：通过优化生产工艺来控制以VERO细胞为载体的狂犬疫苗生产中的残留DNA。方法采用双抗体夹心ELISA法检测评估抗原回收率，通过DNA探针杂交法检测残留DNA。采用检测抗原回收率和DNA残留率对狂犬疫苗生产中的核心环节－超滤的3个关键因素：超滤膜包的选择、超滤压力以及浓缩倍数进行评估，并评价鱼精蛋白预处理超滤液对于上述两指标的影响。结果与结论综合抗原回收率、DNA去除率以及生产层面的因素，获得了超滤工艺的最优条件，即以截留相对分子质量为7．5×105的超滤膜包、20倍浓缩和15 psi的超滤压力作为超滤工艺的核心参数。通过鱼精蛋白的预处理，初步探明超滤截留是通过分子筛的模式截留DNA，而鱼精蛋白的加入可以结合碎片化的DNA，形成较大的分子片段，从而更利于超滤截留。