抗猪流感病毒的单链抗体在真核细胞中的表达

• 作者: 刘迎春 杨康 王权 蒋蔚 陈永军
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流感病毒 单链抗体 真核表达
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 页码范围: 1268-1272
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.5
• 语种: 中文

摘要

为了研究抗猪流感病毒的单链抗体(scFv)在真核细胞内的表达情况及其生物学特性,通过PCR从前期试验获得的重组噬粒中扩增出scFv基因,将其克隆到真核表达载体p3×FLAG-CMV-7.1中,测序验证后转染A549细胞进行表达,对表达蛋白进行特性分析.结果显示,scFv基因的核苷酸序列的长度为732 bp,序列排列方式为VH-Linker-VL,与数据库比对结果表明,符合小鼠抗体的重链和轻链可变区基因的结构特征.间接免疫荧光试验的结果表明,细胞内表达的绿色荧光蛋白主要分布在细胞质中.Western-blot分析显示,转染细胞的培养液上清和细胞裂解液上清中均可检测到一约32.8 ku的融合蛋白,与预测结果一致.ELISA结果表明,表达的scFv具有结合猪流感病毒的活性.结果证实,抗猪流感病毒的scFv能够在细胞内正确表达,为进一步对抗猪流感的免疫治疗及免疫检测的研究提供了依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王权	中国农业科学院上海兽医研究所	65	346	11.0	15.0
2	蒋蔚	中国农业科学院上海兽医研究所	25	104	6.0	9.0
3	刘迎春	中国农业科学院上海兽医研究所	13	74	5.0	8.0
4	陈永军	中国农业科学院上海兽医研究所	27	211	10.0	14.0
5	杨康	中国农业科学院上海兽医研究所	5	19	3.0	4.0