SIRT1对高糖诱导的系膜细胞NF-κB p65乙酰化及MCP-1表达的影响

• 作者: 杜月光 柴可夫 汪丽佩
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 沉默信息调节因子1 NF-κB 单核细胞趋化蛋白1 肾小球系膜细胞 糖尿病肾病
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 722-726
• 分类号: R587.24
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1008.2014.00722

摘要

目的 探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞(RMC)核因子κB(NF-κB) p65蛋白乙酰化及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响.方法 构建干扰SIRT1基因的shRNA慢病毒质粒pTRC-shSIRT1并进行鉴定.将RMC分为高糖组(用高糖培养液培养)、白藜芦醇(SIRT1激活剂)+高糖组(用含1μmol/L白藜芦醇的低糖培养液培养24 h后,换用高糖培养液培养)、SIRT1 RNAi组(添加干扰病毒pTRC-shSIRT1感染4h后,换用低糖培养液培养)、SIRT1 RNAi+高糖组(添加干扰病毒pTRC-shSIRT1感染4h后,换用高糖培养液培养),同时设正常对照组和甘露醇高渗对照组.以实时荧光定量PCR检测SIRT1、MCP-1的mRNA表达,蛋白质印迹法检测SIRT1和NF-κB p65乙酰化蛋白的表达,ELISA技术检测MCP-1蛋白含量.结果 质粒测序证实干扰SIRT1基因的shRNA慢病毒载体构建成功,且能抑制RMC中SIRT1基因表达(P＜0.01).高糖刺激使RMC SIRT1基因表达降低,NF-κB p65蛋白乙酰化增强,MCP-1 mRNA和蛋白水平增高;SIRT1激活剂白藜芦醇可逆转高糖引起的变化;而沉默SIRT1可促进高糖诱导的RMC NF-κB p56乙酰化及MCP-1mRNA和蛋白表达(P＜0.05或0.01).结论 SIRT1可抑制高糖诱导的RMC MCP-1表达,其机制可能与NF-κB p56去乙酰化有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜月光	浙江中医药大学病理生理学教研室	70	325	10.0	14.0
2	柴可夫	浙江中医药大学中医临床基础研究所	233	1322	18.0	27.0
3	汪丽佩	浙江中医药大学病理生理学教研室	29	111	6.0	9.0