基因工程菌诱导表达苏云金芽胞杆菌Vip3Aa蛋白的条件优化

• 作者: 关雄 宋飞飞 李梦楠 陈凡冰 黄志鹏
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 苏云金芽胞杆菌 Vip3Aa蛋白 诱导表达条件 正交试验
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1434-1440
• 页数: 7页
• 字数: 4025字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2014.11.014

摘要

营养期杀虫蛋白(vegetative insecticidal protein, Vip)是在苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis, Bt)营养生长至对数中期到稳定期期间产生的一类蛋白。为获得苏云金芽胞杆菌Vip3Aa蛋白的高效表达条件，本研究利用正交试验综合考察了大肠杆菌(Escherichia coli)重组基因工程菌BL21-pCzn1-Vip诱导过程中诱导剂浓度、诱导时间和诱导温度对Vip3Aa蛋白表达量的影响。结果表明，该工程菌目的蛋白的最优诱导表达条件：诱导温度21℃、诱导时间8 h、诱导剂(异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside, IPTG))浓度为200μg/mL；直观分析表明，影响目的蛋白表达量的最主要因素为诱导温度，其次为诱导时间，诱导剂浓度影响最小；方差分析结果表明，诱导温度的P值＜0.01、诱导时间的P值＜0.05、诱导剂浓度的P值＞0.05，与直观分析结果相一致；利用优化后诱导表达条件进行培养，测得目的蛋白最高表达量可占总蛋白的27.6%，相当于常规诱导方法的2.3倍。本研究为大量制备高纯度Vip3Aa蛋白及其深入的理论研究和实践应用提供了基础资料。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	关雄	福建农林大学教育部生物农药与化学生物学重点实验室	112	2066	21.0	43.0
2	陈凡冰	福建农林大学教育部生物农药与化学生物学重点实验室	3	4	1.0	2.0
6	宋飞飞	福建农林大学教育部生物农药与化学生物学重点实验室	2	4	1.0	2.0
10	李梦楠	福建农林大学教育部生物农药与化学生物学重点实验室	1	1	1.0	1.0