LIMK1在结肠癌中表达与沉默对人结肠癌细胞迁移与侵袭的影响

• 作者: 史玲 向姝霖 夏红 廖爱军 潘志兵 苏坚 苏琦 董琳
• 来源期刊: 中南医学科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠癌 SW480细胞 LIMK1 RNA干扰 迁移与侵袭
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 109-115
• 页数: 7页
• 分类号: R735.35
• 字数: 4939字
• 语种: 中文

摘要

目的探讨LIMK1在结肠癌中的表达与临床病理参数的关系和沉默LIMK1对人结肠癌SW480细胞迁移与侵袭的影响。方法免疫组化检测LIMK1在结肠癌表达；RNA干扰建立LIMK1-miR/SW480细胞株；RT-PCR与Western blot分别检测LIMK1 mNRA与蛋白及磷酸化LIMK1表达；划痕实验和侵袭实验检测沉默LIMK1对SW480细胞迁移与侵袭的影响。结果免疫组化显示,LIMK1在结肠癌中表达明显高于结肠正常组织,高分化腺癌表达明显低于中分化与低分化腺癌,而低分化高于中分化腺癌；<5.0 cm的结肠癌表达明显低于≥5.0 cm；淋巴结转移显著高于无转移；Dukes分期A+B组表达明显低于C+D组(P<0.05)。 RT-PCR与Western blot显示,LIMK1-miR/SW480细胞LIMK1 mNRA与蛋白表达明显下调,表明成功构建稳定沉默LIMK1基因的SW480细胞。免疫细胞化学证实,沉默组LIMK1表达较未转染组与空载体组明显降低。 Western blot显示,沉默组LIMK1和磷酸化LIMK1较未转染组与空载体组明显下调(P<0.05)。划痕实验显示,沉默组癌细胞迁移率(22.53%)较对照组(76.50%)与空载体组(72.14%)明显降低(P<0.05)。侵袭实验发现,沉默组穿膜细胞(43.67依1.51个)较未处理组(143.33依1.52个)与空载体组(136.34依1.53个)明显减少(P<0.05)。结论 LIMK1表达与结肠癌发生、大小、淋巴结转移及Dukes分期有关。沉默LIMK1基因可抑制人结肠癌SW480细胞迁移与侵袭。