生殖支原体环介导等温扩增检测方法的建立

• 作者: 吴建茹 周瑾 周良佳 杨天 王蓓 胡一珉 谢彦昕 陈璐斯
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 生殖支原体 环介导等温扩增
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 研究生园地
• 页码范围: 860-862
• 页数: 3页
• 分类号: R518.9
• 字数: 2870字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2014.11.17

摘要

目的 建立检测生殖支原体(M.genitalium,Mg)的环介导等温扩增方法.方法 根据GenBank公布的Mg核苷酸序列,设计4条特异性引物,进行PCR反应,对内、外引物浓度,dNTPs和MgS04浓度及Bst DNA聚合酶用量等进行优化,建立MgLAMP的检测方法并进行特异性和敏感性评价;对20份HIV感染者的DNA样本分别进行LAMP和常规PCR检测.结果 内、外引物浓度分别为1.6和0.2 μmol/L,dNTPs浓度为1.6 mmol/L,MgSO4浓度为12 mmol/L,Bst DNA聚合酶用量为8U时,LAMP反应效果较好;用该体系检测同源关系较近的穿通支原体(M.penetrans,Mpe)、梨支原体(M.pirum,Mpi)均呈阴性;对Mg的检测灵敏度可达10-7;20份HIV感染者用LAMP法及常规PCR法各检出Mg阳性标本5份,两法的检测结果一致.结论 建立的Mg LAMP检测方法的特异性、灵敏度较好,成本低廉,适合临床应用.