大肠杆菌和枯草芽孢杆菌来源γ-谷氨酰转肽酶的克隆表达和性质比较

• 作者: 周治 姚忠 孙芸 房鑫 熊强 王浩绮 田思思 韦萍
• 来源期刊: 高校化学工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: γ-谷氨酰转肽酶 重组 热失活 反应动力学 稳定性
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 生物化工
• 页码范围: 282-289
• 页数: 8页
• 分类号: Q557
• 字数: 5695字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-9015.2014.02.014

摘要

γ-谷氨酰转肽酶(GGT)是生物体内谷氨酰循环的关键酶,在生物有机合成领域具有重要的应用价值.今建立了大肠杆菌和枯草芽孢杆菌GGT的克隆、重组及诱导表达方法.在此基础上,分别考察了重组大肠杆菌GGT(rE_GGT)和重组枯草芽孢杆菌GGT(rB_GGT)的催化特性和稳定性.结果表明,rE GGT对供体对硝基苯胺(GpNA)的亲和力(Km)优于rB GGT,但rB GGT的催化常数(Kcat)高达3.48×105 s-1,是rE_GGT的20倍.稳定性研究表明,rE GGT在pH 6～9和T＜45℃条件下的稳定性明显优于rB GGT;但当温度超过45℃时,rB GGT的稳定性更佳.通过对rE GGT和rB GGT的氨基酸组成及其大、小亚基界面相互作用力的分析表明,rE GGT大小亚基间疏水键的数目明显多于rB GGT,有助于稳定其四级结构,使其在中低温下具有良好的稳定性;而rB GGT氨基酸组成中荷电残基和芳香族残基的比例较高,可有效维持其二级结构的稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚忠	南京工业大学食品与轻工学院	74	446	11.0	16.0
2	周治	南京工业大学食品与轻工学院	33	194	7.0	13.0
3	熊强	南京工业大学食品与轻工学院	52	551	13.0	22.0
4	孙芸	南京工业大学食品与轻工学院	34	329	10.0	17.0
5	王浩绮	南京工业大学食品与轻工学院	19	86	5.0	8.0
6	房鑫	南京工业大学食品与轻工学院	2	9	2.0	2.0
7	田思思	南京工业大学食品与轻工学院	1	2	1.0	1.0