四重荧光定量RT-PCR检测人感染新型甲型禽流感H7N9病毒

• 作者: 孙长贵 崔大伟 成军 李静云 杨先知 沈雄文 王国政 谢国良 金美彤
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 甲型禽流感 H7N9 检测 RNA酶P 四重荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2014,（11）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 801-805
• 页数: 5页
• 分类号: R446.5
• 字数: 3408字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2014.11.01

摘要

目的 建立检测人感染新型甲型禽流感H7N9病毒的四重荧光定量RT-PCR方法.方法 以人细胞RNA酶P(RNase P)基因为内参,用Primer Express3.0软件设计PCR特异性引物和探针.通过不同来源的呼吸道病毒进行特异性分析,构建质粒标准品用于分析该方法的灵敏度和重复性,并对1 896例临床标本进行回顾性检测.结果 该方法检测甲型流感病毒(Flu A)、H7、N9与RNaseP灵敏度均达102 copies/mL,特异性达100％,每对引物和探针只检测出相应的病毒,无交叉反应,检测变异系数(CV)均低于1.55％.用该法检测1 896例临床标本,结果Flu A 235例,H7N9 127例,与其他试剂报告结果完全一致.结论 建立的四重荧光定量RT-PCR法可快速检测H7N9病毒,灵敏度与特异性好,可用于H7N9病毒感染患者的早期诊断.