小鼠成纤维细胞激活蛋白多克隆抗体的制备及应用

• 作者: 张坤水 张秋桂 杜军 江冠民 谢婉莹 邱瑜
• 来源期刊: 现代肿瘤医学
• 学科: 医学
• 关键词: 成纤维细胞激活蛋白 多克隆抗体 肿瘤转移 肿瘤间质
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 29-33
• 页数: 5页
• 分类号: R730.3
• 字数: 4908字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4992.2014.01.09

摘要

目的:表达和纯化小鼠成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)二肽基肽酶催化核心序列(FAPαc)融合蛋白(His-FAPαc),制备兔抗小鼠FAPα多克隆抗体,并用此抗体检测FAPα在肿瘤细胞和成纤维细胞以及肿瘤间质中的表达情况.方法:将本实验室构建好的原核表达质粒pET28a(+)-FAPαc转化大肠杆菌BL21,IPTG 诱导表达目的蛋白His-FAPαc;用纯化的目的蛋白免疫新西兰大白兔,获得兔抗小鼠FAPα多克隆抗体;用免疫印迹法和酶联免疫吸附试验检测该多克隆抗体与重组蛋白His-FAPαc 的反应性及检测该多克隆抗体的效价,并用该抗体检测FAPα在肿瘤细胞和成纤维细胞以及肿瘤间质中的表达情况.结果:His-FAPαc融合蛋白可与兔抗小鼠FAPα多克隆抗体特异性结合;该多克隆抗体的效价高,特异性好,并且能检测小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse embryo fibroblast cells;MEF)及结肠癌和乳腺癌的间质细胞高表达FAPα的全长序列蛋白.结论:制备的兔抗小鼠FAPα多克隆抗体能够有效地识别小鼠胚胎成纤维细胞和肿瘤间质细胞表达的FAPα蛋白,为研究FAPα在肿瘤的发生、发展及转移中的作用和以FAPα为靶点而开展的的抗肿瘤研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜军	中山大学药学院微生物与生化药学实验室	61	250	7.0	12.0
2	张坤水	中山大学孙逸仙纪念医院南校区门诊部	26	97	6.0	8.0
3	谢婉莹	南华大学附属第一医院检验科	7	56	2.0	7.0
4	张秋桂	南华大学附属第一医院检验科	44	343	9.0	17.0
5	江冠民	南华大学附属第一医院检验科	4	29	2.0	4.0