人MDM2基因真核表达载体的构建及其与p53的相互作用

• 作者: 付亚莉 叶晨阳 徐建明 李志强 李珊珊 林莉 王岩 葛飞娇 赵传华
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: MDM2 p53 克隆 相互作用
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 524-526
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 1997字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2014.04.017

摘要

目的：构建带Flag标签的MDM2真核表达载体，并检测MDM2与p53的相互作用。方法：从人乳腺文库中PCR扩增MDM2编码序列，将其插入pcDNA3.0-Flag载体，转染293T细胞后用Western印迹检测其在293T细胞中的表达，并通过免疫共沉淀实验检测MDM2与p53的相互作用。结果：双酶切和测序结果表明，Flag-MDM2真核表达载体构建成功，转染293T细胞后成功表达；免疫共沉淀实验证明Flag-MDM2与p53存在相互作用。结论：构建了带Flag标签的人MDM2真核表达载体，并检测了MDM2与p53之间的相互作用，为研究MDM2的功能奠定了基础。