人野生型P53与反义mdm2基因融合体真核表达载体的构建及其在Mc3细胞中的表达

• 作者: 张引成 李昂 李晓红 郅克谦 饶国洲
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 分子克隆 基因表达 Me3细胞 免疫印迹法 P53基因 mdm2基因
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 13-15
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 字数: 2758字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2008.06.004

摘要

目的 构建P53与反义mdm2 cDNA序列真核表达载体,并探讨其在人黏液表皮样癌高转移细胞株Mc3细胞中的表达.方法 应用分子克隆技术,将mdm2cDNA序列反向插入到含有P53基因序列pDOR-Neo中的P53基因序列下游,构成含有P53基因与反义mdm2基因融合基因的逆转录病毒表达载体.经酶切分析鉴定后命名为pDOR-Neo-p53-F mdm2并将重组载体通过脂质体转染Mc3细胞,通过G418筛选转染阳性细胞,并采用Western blot方法检测P53蛋白表达.结果 酶切鉴定证实重组载体含有P53与反义mdm2 cDNA片段,实验结果表明:转染后P53蛋白(1.35±0.14)较对照组P53蛋白(6.26±0.11)含量显著减低(P<0.01),转染空载体P53蛋白(6.24±0.12)与对照组比较无统计学差异(P>0.05).结论 P53与反义mdm2基因融合体真核表达载体构建成功,并表达野生型P53蛋白和封闭mdm2基因,为今后进一步研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李昂	西安交通大学口腔医院中心实验室	81	451	12.0	17.0
2	郅克谦	西安交通大学口腔医院颌面外科	49	278	10.0	13.0
3	张引成	西安交通大学口腔医院颌面外科	46	240	6.0	13.0
4	李晓红	西安交通大学口腔医院修复科	72	390	10.0	16.0
5	饶国洲	西安交通大学口腔医院中心实验室	64	326	9.0	14.0