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摘要:
目的 以1例恶性胸腺瘤并发外阴部感染患者溃疡部位拭子标本为模型,建立适用于临床病毒检测的宏基因测序平台.方法 提取该患者外阴部水疱液中的全部核酸,通过不依赖序列的单引物扩增(SISPA)后进行Ion Torrent PGM高通量测序,筛选出与病毒相关的测序读长(reads)与NCBI数据库中的序列进行比对,分析标本中病毒核酸的种类及丰度,并与荧光定量PCR法比较.结果 共获得320 049条读长,4 288条(1.3%)与病毒相关,其中2 629条为噬菌体基因,其余1 659条读长中与人类疾病相关的有单纯疱疹病毒2型(HSV-2) 14条(0.84%)、指环病毒属(Anellovirus)1 361条(82.0%)、多瘤病毒属(Polyomavirus)19条(1.14%)、乳头瘤病毒属101(Papillomavirus 101)6条(0.40%),反转录病毒科80条(4.82%)、痘病毒科45条(2.7%)、其他病毒如植物、鱼类、禽类病毒117条(7.05%)、未分类病毒17条(1.02%);疱疹病毒序列鉴定结果表明,14条读长注释为HSV-2(NC_001798),且用荧光定量PCR确认为HSV-2阳性,两法结果一致;噬菌体序列分析发现2 629条读长为噬菌体基因,其中1 251条为肠杆菌噬菌体(占47.6%),1 331条为葡萄球菌噬菌体(占50.6%).结论 初步建立了基于Ion Torrent PGM的病毒宏基因组测序平台并成功检测出HSV-2,为其在临床中的应用提供了实验依据.
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文献信息
篇名 病毒宏基因组高通量测序在临床感染性疾病诊断中的应用
来源期刊 临床检验杂志 学科 医学
关键词 病毒宏基因组 高通量测序 临床诊断
年,卷(期) 2014,(12) 所属期刊栏目 临床检验技术研究
研究方向 页码范围 903-905
页数 3页 分类号 R736.3
字数 2562字 语种 中文
DOI 10.13602/j.cnki.jcls.2014.12.07
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 周强 广东省中医院检验科 72 335 11.0 13.0
2 梁颖 广州医科大学附属第一医院检验科 19 73 5.0 7.0
3 卢妙莲 广东省中医院检验科 16 53 3.0 6.0
4 宋金龙 广州医科大学附属第一医院检验科 12 76 4.0 8.0
5 林勇平 广州医科大学附属第一医院检验科 36 133 6.0 9.0
6 罗娅莎 广州中医药大学第二临床医学院 3 12 3.0 3.0
传播情况
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病毒宏基因组
高通量测序
临床诊断
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