荧光显色技术在鸭坦布苏病毒LAMP检测方法中的应用及比较

• 作者: 伊惠 张伟 张琳 张秀美 杨少华 胡北侠 许传田 逯茂洋 黄庆华
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭坦布苏病毒 环介导等温扩增 荧光显色剂
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 页码范围: 406-411
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文

摘要

参考NCBI中已收录的鸭坦布苏病毒(DTMUV)E基因保守区域设计了6条引物,通过对反应体系中各组分和条件进行优化,建立了DTMUV环介导等温扩增(LAMP)检测体系,并应用荧光显色剂(SYBR Green Ⅰ和钙黄绿素、锰离子)对扩增产物进行可视化判定.结果显示,以SYBR GreenⅠ为染料,显色敏感性为10 copies/μL的病毒,比普通PCR高100倍;以钙黄绿素和锰离子组合作为显色剂,其显色极限为1 000 copies/μL的病毒,虽低于SYBR GreenⅠ的显色敏感性,但能有效地避免气溶胶造成的空气环境污染.结果表明,本研究建立的荧光显色LAMP体系敏感性高、能避免交叉污染,具有在科研机构、基层实验室特别是检测现场推广和应用的潜力,能够为从源头遏制该病的发生和蔓延提供有效的手段.