鸭坦布苏病毒SYBR Green qPCR检测方法的建立

• 作者: 时长军 朱婷 李永旺 王凯民 钱伟 陆春华 陈国强 陈雷
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭坦布苏病毒 qPCR 灵敏性 特异性
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 78-81
• 页数: 4页
• 分类号: S852.6
• 字数: 3488字
• 语种: 中文

摘要

通过BLAST比较已公布的鸭坦布苏病毒核酸序列,在其E基因保守区域设计了4对引物,并用鸭坦布苏病毒培养物核酸筛选出最佳的一对引物建立了SYBR Green qPCR.用构建的重组质粒建立标准曲线,扩增效率为90.5％,在2.0× 101 ～2.0× 108copies/μL范围内具有良好的线性关系,最低检测限为100拷贝/反应.、该qPCR方法可以检测5个鸭坦布苏病毒分离株以及WF100活疫苗,灵敏性比文献已发表的其他3对引物高10倍;且特异性很好,不与其他常见禽类病毒交叉反应.由此表明本研究新建了一种高度灵敏和特异的鸭坦布苏病毒的SYBR Green qPCR检测方法.