鸭坦布苏病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 尹秀凤 张小飞 徐延伟 朱鹏 许秀梅 靳宇田 黄显明
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭坦布苏病毒 荧光定量RT-PCR 应用
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 页码范围: 46-50
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 3159字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank已发表的鸭坦布苏病毒（Duck Tembusu virus，DTMUV）基因组（登录号：JX273153）保守基因序列，设计了1对特异性引物及TaqMan探针，以DTMUV重组质粒为阳性标准品模板，建立了快速、准确检测DTMUV的荧光定量RT-PCR方法。结果显示，该方法特异性好，仅能在DTMUV样本中检出荧光信号，与其他病原不发生交叉反应；敏感性高，最低检测限可达25 copies/μL；不同梯度定量模板的拷贝数的对数值与CT值之间的线性关系表达式为Ct=–3.323×Lg（conc）+43.70，相关系数R2＝0.997，扩增效率E＝100%，DNA在2.5×101～2.5×107个拷贝数内检测曲线有良好的线性关系。对来源于江苏省和安徽省的29份疑似鸭坦布苏病毒感染的病鸭组织进行荧光定量RT-PCR检测，结果有27份呈现阳性，阳性检出率为93.10%，比常规RT-PCR的敏感性高。研究结果表明，该方法快速、灵敏、特异、重复性好且能实时定量检测，可用于DTMUV的临床检测和分子流行病学调查。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尹秀凤	南京天邦生物科技有限公司生物技术研究所	30	141	7.0	10.0
2	黄显明	南京天邦生物科技有限公司生物技术研究所	15	104	4.0	10.0
3	许秀梅	南京天邦生物科技有限公司生物技术研究所	8	28	3.0	5.0
4	靳宇田	南京天邦生物科技有限公司生物技术研究所	4	16	1.0	4.0
5	徐延伟	南京天邦生物科技有限公司生物技术研究所	5	31	3.0	5.0
6	朱鹏	南京天邦生物科技有限公司生物技术研究所	3	19	2.0	3.0