鸡Ⅰ型IFN及TLR-3和TLR-7实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 孙忠晟 尹燕博 曹志伟 王建琳 郭学金
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: IFN-α IFN-β TLR-3 TLR-7 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 25-27,30
• 页数: 4页
• 分类号: R446.1
• 语种: 中文

摘要

为检测鸡抗病毒相关基因在病毒感染过程中的动态变化规律,研究建立了鸡IFN-α、IFN-β、TLR-3和TLR-7的实时荧光定量RT-PCR的检测方法.根据GenBank提供的鸡IFN-α、IFN-β、TLR-3和TLR-7参考序列设计了相应的特异引物,用常规RT-PCR方法从鸡脾脏总RNA中扩增得到鸡相应基因.将其cDNA分别克隆到pMD19-T载体中进行测序鉴定,采用SYBR Green I染料法,建立标准曲线并分析其溶解曲线.结果表明,这4种基因的检测灵敏度可高达46 copies/μL,且具有良好的特异性和重复性.此检测方法的建立为动态定量检测及研究鸡IFN-α、IFN-β、TLR-3和TLR-7基因的表达变化提供了有效的手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尹燕博	青岛农业大学动物科技学院	69	359	11.0	15.0
2	王建琳	青岛农业大学动物科技学院	46	127	7.0	10.0
3	孙忠晟		5	19	2.0	4.0
4	曹志伟	青岛农业大学动物科技学院	2	5	1.0	2.0
5	郭学金	青岛农业大学动物科技学院	2	1	1.0	1.0