对一种多基因组装方法的改进

• 作者: 湛欣 袁金英 赵先海 邓小梅 黄浩
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 烟草 载体 多基因 Gateway 组装
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 转基因研究
• 页码范围: 95-100
• 分类号: Q782
• 语种: 中文
• DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2014.03.13

摘要

改建了基于Cre/LoxP重组的2个供体载体和1个兼容Gateway系统的供体载体:pYLd1GW/pYLd2GW、pYLd1GW35s/pYLd2GW35s和pYLd1GWMPK/pYLd2GWMPK.在改建载体的基础上构建了2个供体载体pYLd1GWMdSPDS1和pYLd2GWCBF1,并将2个基因构建于受体载体pYL1305,得到双价表达载体pYL1305MC.采用农杆菌介导的叶盘法转化烟草,经PCR检测和GUS组织化学染色检测发现,双价基因已成功转入烟草.对6株转基因烟草进行荧光定量PCR检测,发现在不同植株中同一基因表达量差异很大,但2个基因表达量差异趋势一致.