抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备

• 作者: 史建荣 徐剑宏 曹欢 祭芳
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 工学
• 关键词: 玉米赤霉烯酮 单克隆抗体 酶联免疫吸附法
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 加工贮藏·质量安全
• 页码范围: 417-422
• 页数: 6页
• 分类号: TS207.5
• 字数: 4623字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2014.02.030

摘要

为建立快速、简单、灵敏、有效的玉米赤霉烯酮的检测方法,将玉米赤霉烯酮与羧甲氧基胺半盐酸盐反应,合成半抗原ZEN-oxime,通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备玉米赤霉烯酮人工抗原,以人工抗原ZEN-BSA免疫BALB/C小鼠,取该鼠脾细胞与SP 2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和克隆,得到了1株能稳定分泌抗玉米赤霉烯酮抗体的单克隆细胞株3D10.3D10的抗体类型及亚类均为IgM,其轻链为Kappa链.制备的单克隆抗体腹水通过间接酶联免疫吸附测定,效价在1×10-6以上.该单克隆抗体对玉米赤霉烯酮的IC50为225 ng/ml,除与玉米赤霉烯酮结构类似物有一定的交叉反应外,与其他参试真菌毒素均无交叉反应.所制备的单克隆抗体可用于玉米赤霉烯酮毒素初筛和定性检测.