同源重组敲除临床肺炎克雷伯菌质粒blaKPC-2基因

• 作者: 仉英 刘红 王蓓 田月如 艾芙琪 蒋晓飞 马逸珉
• 来源期刊: 检验医学
• 学科: 医学
• 关键词: 基因敲除 同源重组 肺炎克雷伯菌
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 微生物分子诊断专题
• 页码范围: 603-606
• 页数: 4页
• 分类号: R446.5
• 字数: 2734字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2014.06.006

摘要

目的：建立敲除临床肺炎克雷伯菌耐药菌株质粒上的耐药基因的方法。方法聚合酶链反应（PCR）分别扩增试验菌株待敲除目的基因blaKPC-2的上下游片段及质粒pMQ300的潮霉素耐药基因片段，采用重叠延伸基因扩增（SOE-PCR）技术构建融合片段，以耐阿普霉素的λred质粒pKOBEG-Apr为介导，同源重组敲除临床肺炎克雷伯菌耐药菌株的blaKPC-2基因。用含潮霉素和阿普霉素的LB培养基筛选重组子，用PCR和逆转录PCR扩增检测blaKPC-2基因、潮霉素耐药基因及药物敏感性验证重组子。结果不同多位点序列分析（MLST）型别的2株临床肺炎克雷伯菌耐药菌株的blaKPC-2基因得以敲除。结论λred同源重组法可以可靠敲除临床肺炎克雷伯菌耐药菌株质粒上的基因。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋晓飞	复旦大学附属华山医院检验科	65	553	13.0	21.0
2	王蓓	复旦大学附属华山医院检验科	47	311	10.0	16.0
3	刘红	复旦大学附属华山医院检验科	96	682	14.0	21.0
4	艾芙琪	复旦大学附属华山医院检验科	10	62	4.0	7.0
5	马逸珉	复旦大学附属华山医院检验科	8	53	3.0	7.0
6	仉英	复旦大学附属华山医院检验科	6	53	4.0	6.0
7	田月如	复旦大学附属华山医院检验科	16	129	6.0	11.0