人脐带间充质干细胞来源外体提取方法的比较

• 作者: 史惠 吴晓丹 孙瑶湘 张斌 朱伟 朱艳华 许文荣 钱晖
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脐带间充质干细胞 外体 差速离心法 蔗糖密度梯度离心法 比较
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 350-353
• 页数: 4页
• 分类号: R71
• 字数: 3793字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2014.05.08

摘要

目的 比较蔗糖密度梯度离心法和差速离心法提取的脐带间充质干细胞来源外体(hucMSC-Ex)在高丰度蛋白质含量和纯度上的差异.方法 分别用蔗糖密度梯度离心法和差速离心法提取hucMSC-Ex,透射电镜下观察两法提取的外体的形态结构,SDS-PAGE分析二者的蛋白质组分,western blot检测二者的表面标志蛋白CD9和CD81,免疫荧光法检测二者内化至靶细胞EA.hy926的数量.结果 两种方法提取的hucMSC-Ex均为直径约30～100 nm的圆形或椭圆形膜性囊泡结构;在相同蛋白质总量下,差速离心法提取的hucMSC-Ex高丰度蛋白质含量明显低于蔗糖密度梯度离心法,但其表面标志蛋白CD9和CD81的表达量却明显高于蔗糖密度梯度离心法;在相同蛋白质浓度下,差速离心法提取的hucMSC-Ex被靶细胞EA.hy926细胞内化的数量更多.结论 两种方法均能成功提取hucMSC-Ex,差速离心法提取的hucMSC-Ex纯度更高,而高丰度蛋白质含量明显降低.