抗瓜氨酸化聚合兔IgG抗体ELISA法的建立及初步应用

• 作者: 张敏杰 李利平 李晓军 王洁 虞伟
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 类风湿因子 聚合兔IgG 瓜氨酸化 类风湿关节炎 酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 345-349
• 页数: 5页
• 分类号: R446.6|R593.22
• 字数: 4571字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2014.05.07

摘要

目的 建立检测血清抗瓜氨酸化聚合兔IgG(citrullinated aggregated rabbit IgG,Cit-AgRIgG)抗体的ELISA方法,探讨其对类风湿关节炎(RA)的诊断价值.方法 将兔IgG于62℃加热聚合变性,用肽酰精氨酸脱亚胺酶(PAD)将内含精氨酸催化生成瓜氨酸,制成瓜氨酸化聚合兔IgG (Cit-AgRIgG).以此作为抗原,包被反应板微孔,建立检测抗Cit-AgRIgG抗体的ELISA方法.经方法学考核后,检测临床标本并对结果进行评价.结果 Cit-AgRIgG显示出与抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体有较高的结合活性.以其为包被抗原建立的检测抗Cit-AgRIgG抗体的ELISA法批内和批间平均变异系数分别为4.5％和9.5％.特异性阻断试验显示,Cit-AgRIgG、AgRIgG与CCP抗原对该抗体的最高抑制率分别为80.0％、65.9％和25.0％.抗Cit-AgRIgG与抗AgRIgG抗体的cut off值分别为0.565和0.459,此时RA患者抗Cit-AgRIgG抗体阳性率显著高于其他疾病和健康人对照组(P均＜0.01),其诊断RA的敏感性为79.3％,特异性为96.5％,阳性、阴性预测值分别为84.7％和95.1％,阳性、阴性似然比分别为22.66、0.215,Youden指数为0.758,ROC曲线下面积(AUGROC)为0.890.对RA和健康人对照者检查结果显示,抗Cit-AgRIgG与抗AgRIgG抗体(RF)总符合率97.7％,与抗CCP抗体总符合率91.7％.结论 建立的检测抗Cit-AgRIgG抗体的ELISA法有良好的稳定性和特异性.抗Cit-AgRIgG抗体兼具RF与抗CCP抗体的双重特性,有可能发展成为RA疾病诊断和病情监测的一种新的参考指标.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓军	南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所	109	618	13.0	19.0
2	王洁	南京师范大学生命科学学院	22	93	5.0	8.0
4	虞伟	南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所	76	313	10.0	13.0
7	李利平	南京师范大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
11	张敏杰	南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所	1	0	0.0	0.0