千金子甾醇诱导HL-60细胞凋亡机制研究

• 作者: 任霞 史美燕 姜国胜 张洪海 张超 李霞 王杰伟 郭菲
• 来源期刊: 中华肿瘤防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 千金子甾醇 白血病 HL-60细胞 细胞凋亡 Bcl-2/Bax
• 年，卷（期）: 2014,（23）
• 所属期刊栏目: 实验研究/论著
• 页码范围: 1865-1870
• 分类号: R733
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨Bcl-2/Bax信号通路在千金子甾醇诱导HL-60白血病细胞发生凋亡中的作用及其分子机制研究.方法 HL-60细胞培养体系中分别加入大、中、小剂量千金子甾醇溶液,甾醇溶液作用细胞24h后,采用CCK-8法检测千金子甾醇对HL-60细胞增殖的抑制作用,光镜下观察细胞形态学变化,Annexin V/PI流式细胞术检测细胞凋亡,RT-PCR法检测Bcl-2/Bax、Caspase-9和Caspase-3 mRNA转录水平,ELISA法检测Caspase-9和Caspase-3蛋白活性.结果 CCK-8法检测结果显示,与对照组比较,千金子甾醇能明显抑制HL-60细胞增殖(F=42.97,P＜0.001),各个浓度之间进行比较,差异有统计学意义,P＜0.05.流式细胞术检测细胞凋亡率显著增加(F=56.74,P＜0.001),经10、20和40 μg/mL千金子甾醇处理24 h后,HL-60细胞早期凋亡率分别为(23.4±3.1)％、(35.7±4.3)％和(53.2±3.9)％,细胞呈典型凋亡形态学改变.千金子甾醇作用后,Bax mRNA转录水平显著升高,Bcl2 mRNA转录水平显著降低,且呈化合物剂量依赖性(F=53.45,P＜0.001),Caspase-9和Caspase-3 mRNA转录水平升高,且呈化合物剂量依赖性(F=34.21,P＜0.001),千金子甾醇对HL-60细胞作用24 h后Caspase-9和Caspase-3蛋白活性显著升高(F=54.33,P＜0.001),且随着千金子甾醇浓度增加蛋白活性逐渐升高.结论 千金子甾醇通过调节Bcl-2/Bax凋亡信号通路,诱导HL-60细胞凋亡,其作用呈明显剂量依赖性.