用shRNA下调泛素表达抑制人肺癌H1299细胞生长并促进其凋亡

• 作者: 何燕 吴锦昌 唐益庭 张舒羽 曹建平 朱巍 申文豪
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 泛素 肺癌 细胞生长 细胞凋亡 细胞周期阻滞
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 1287-1290
• 分类号: R34
• 语种: 中文

摘要

目的 通过下调人肺癌细胞中泛素(Ub)基因的表达,研究其对肺癌细胞生长的影响及其作用机制.方法 设计沉默泛素基因表达的shRNA-UBB、shRNA-UBC质粒,用反转录PCR及Western blot法验证shRNA的沉默效果;研究泛素低表达后H1299细胞的生长和克隆形成能力的变化;采用annexin V-PE及DNA片段法检测细胞凋亡变化;PI染色结合流式细胞术检测细胞周期的变化.结果 敲减泛素基因(Ub-KD)48、72 h后,能明显抑制H1299细胞的增殖、降低细胞的克隆形成率;与对照组相比,Ub-KD (shRNA-UBB/UBC)组细胞凋亡率显著增加(shRNA-NC:5.60％,shRNA-UBB:9.07％,shRNA-UBC:11.70％,shRNA-UBB/UBC:17.82％).联合shRNA-UBB、shRNA-UBC作用下能显著增加H1299细胞G1期比例(shRNA-NC:34.53％,shRNA-UBB:34.40％,shRNA-UBC:42.77％,shRNA-UBB/UBC:50.20％).结论 联合敲减UBB、UBC基因通过增加细胞凋亡及细胞G1期阻滞抑制肺癌细胞的生长及克隆形成能力.