绵羊肺炎支原体热休克蛋白Hsp70 C末端基因原核表达

• 作者: 周碧君 孔令萍 文明 李益 王开功 王慧 程振涛 罗成波 覃岚
• 来源期刊: 西北农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊肺炎支原体 Hsp70 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 页码范围: 130-134
• 页数: 5页
• 分类号: S852.62
• 字数: 3932字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7606/j.issn.1004-1389.2014.04.021

摘要

为研究绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)热休克蛋白Hsp70抗原特性,以Mo贵州分离株为模板扩增得到Hsp70蛋白C末端基因,将目的基因连接至pET-28a原核表达载体,经PCR、双酶切和序列测定正确的阳性重组质粒转化E.coli Rosseta表达菌,IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE及Western blotting分析.结果显示,经PCR从Mo贵州分离株扩增获得567 bp的C末端片段,并成功构建含Mo Hsp70蛋白C末端基因的原核表达质粒,经IPTG诱导表达获得分子质量约为27 ku的目的蛋白,且目的蛋白能与Mo阳性血清印迹反应.说明,成功构建可有效表达Mo贵州分离株Hsp70蛋白C末端基因的原核表达载体.