结核分枝杆菌热休克蛋白Hsp70在原核表达载体中的克隆表达与鉴定

• 作者: 朱玉贤 苏洁 蔡宏
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 热休克蛋白 载体 克隆 表达与鉴定
• 年，卷（期）: 2006,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 712-715
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2736字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2006.08.005

摘要

目的 对结核分枝杆菌的一种热休克蛋白Hsp70基因进行克隆,鉴定,并在原核系统中表达.方法 以结核杆菌H37Rv菌株基因组DNA为模板,用PCR法对基因Hsp70进行扩增,产物与载体质粒pET-22b(+)构建表达Hsp70的重组质粒,将此重组质粒先转化到E.coli DH5 α内提取质粒,酶切鉴定,再转化入表达宿主E.coli BL21(DE3)PlysS菌株内,对转化菌株以IPTG进行诱导后,破菌,离心,上清进行SDS-PAGE,通过电转移将胶中蛋白转到硝酸纤维素薄膜上后进行免疫印迹分析.结果 电泳发现转化了重组质粒的菌株有表达蛋白,所表达的蛋白质相对分子质量为70 000,抗体检测有特异带大小为70kDa.结论 成功进行了结核杆菌分泌热休克蛋白Hsp70基因的克隆表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱玉贤	北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室	53	478	14.0	19.0
2	蔡宏	北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室	49	262	9.0	13.0
3	苏洁	北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室	4	5	2.0	2.0