IL-7联合IL-2对脐血CD4＋CD25-T细胞体外诱导扩增影响的研究

• 作者: 仉洁 刘志文 刘薇 李俊甫 邢龙龙 郝京生 钟理
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白介素7 脐血 CD4+CD25+T细胞 调节性T细胞
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 879-883,892
• 页数: 6页
• 分类号: R392.12
• 字数: 3549字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2014.07.004

摘要

目的：初步探讨IL-7联合IL-2对脐血CD4＋CD25-T细胞体外扩增的促进作用，建立稳定的体外培养扩增脐血CD4＋CD25-Tregs的培养体系，比较诱导扩增后的CD4＋CD25＋Tregs和自然分选的CD4＋CD25＋Tregs对PBMCs功能活性的影响。方法：采用免疫磁珠分选法分选出脐血CD4＋CD25-T细胞和CD4＋CD25＋T细胞；加入不同浓度的细胞因子IL-7结合适当浓度的IL-2作为诱导剂，分析IL-7体外诱导CD4＋CD25-T细胞增殖的有效性及最适浓度。我们利用流式细胞术检测体外扩增后的CD4＋CD25-T细胞表型变化；MTS法检测体外诱导扩增的CD4＋CD25＋Tregs及自然分选的CD4＋CD25＋Tregs分别对成人外周血中单个核细胞增殖的抑制作用；RT-PCR方法分析体外诱导扩增的CD4＋CD25＋Tregs 及自然分选的CD4＋CD25＋Tregs FOXP3基因、IL-10基因和TGF-β基因的cDNA表达的变化。结果：经3周体外培养、各组细胞均有明显的扩增。 IL-7诱导组的扩增最强。体外抑制试验显示体外扩增的Tregs对成人外周血中单个核细胞有明显的抑制作用，IL-7联合IL-2诱导CD4＋CD25-T细胞生成的CD4＋CD25＋Tregs具有较自然分选的CD4＋CD25＋Tregs稍弱的免疫抑制功能，其中IL-7浓度为4 ng／ml，IL-2浓度为2000 U／ml时诱导CD4＋CD25-T细胞生成的CD4＋CD25＋Tregs杀伤活性最强。结论：成功建立了CD4＋CD25＋Tregs的体外培养体系，联合应用IL-7、大剂量的IL-2和CD3／CD28单抗是体外诱导扩增CD4＋CD25-T细胞成为CD4＋CD25＋Tregs的优选方法，并且扩增倍数高、可持续高表达CD4及CD25细胞表型。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钟理	河北大学生命科学学院	29	155	7.0	11.0
2	仉洁	河北大学生命科学学院	4	15	3.0	3.0
3	郝京生		1	7	1.0	1.0
4	李俊甫	河北大学生命科学学院	2	12	2.0	2.0
5	邢龙龙		1	7	1.0	1.0
6	刘志文		2	7	1.0	2.0
7	刘薇		3	8	1.0	2.0