Jagged1活化Notch通路促进RAW 264.7向破骨分化但抑制增殖

• 作者: 刘复州 初同伟 卓云云 周跃 毛德举 沈伟伟 王汝杰 胡旭 陈培 陈武桂
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Jagged1 破骨细胞 Notch 细胞分化 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 865-869
• 页数: 5页
• 分类号: R392
• 字数: 3827字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2014.07.001

摘要

目的：探讨Jagged1通过活化Notch通路对RAW 264畅7细胞向破骨分化及增殖的影响。方法：将RAW 264畅7细胞分三组培养：对照组（细胞培养基＋鼠RANKL 50 ng／L）、Jagged1组（细胞培养基＋鼠RANKL ＋Jagged1重组蛋白）、γ-分泌酶抑制剂（ DAPT）组（细胞培养基＋鼠RANKL ＋Jagged1重组蛋白＋DAPT），实时荧光定量PCR检测各组破骨细胞标志基因组织蛋白酶K（Cathepsin K，CK）、抗酒石酸性磷酸酶（Tartrate-resistant acid phosphatase， TRAP）、降钙素受体（Calcitionin receptor， CTR）及Notch靶基因HES-1、HEY-1 mRNA的表达，TRAP染色鉴定破骨细胞，扫描电镜检测破骨细胞溶骨功能。免疫荧光检测NICD的表达变化，CCK-8检测RAW 264畅7细胞增殖。结果：Jagged1组TRAP、CK、CTR 及HES-1、HEY-1 mRNA 的表达、TRAP＋细胞数较对照组及DAPT组明显升高（P＜0畅05），而DAPT组与对照组均无明显变化；细胞免疫荧光显示Jagged1组NICD除表达于细胞膜、细胞质外，细胞核也有较高表达，对照组及DAPT组细胞核中NICD无明显表达；细胞培养48 h，Jagged1组细增殖较对照组及DAPT组出现明显抑制。结论：Jagged1通过活化Notch通路促进RAW 264畅7向破骨细胞分化、抑制其增殖。