齿毛菌漆酶的基因克隆、异源表达及脱色研究

• 作者: 余湘萍 叶秀云 杨捷 林娟 郑邦晓
• 来源期刊: 福州大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 齿毛菌 漆酶 克隆 异源表达 酶学性质 脱色
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 页码范围: 285-292
• 页数: 8页
• 分类号: Q814.9
• 字数: 5499字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7631/issn.1000-2243.2015.02.0285

摘要

通过简并PCR、TAIL-PCR、SiteFinding PCR等方法从实验室前期筛选得到的一株齿毛菌中获得漆酶Lac基因(包括启动子)序列,将其cDNA转入Pichia pastoris X33中表达,以ABTS(2,2-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid))为底物测定温度和pH对酶活及其稳定性的影响,并探究重组漆酶的脱色效果.结果表明,Lac DNA长3 129 bp,含有10个内含子,编码的Lac蛋白共有542个氨基酸,与已知漆酶氨基酸序列的相似性最高为60％,在5’端950 bp序列内发现多个可能的启动子元件;成功分泌表达重组漆酶rLac,在含1 mmol·L-1铜离子的YP培养基中28℃发酵15 d达到酶活最高峰2.89 U·mL-1;酶学性质研究发现,rLac的最适作用温度和pH值分别为55℃和3.0,且在pH 4～10及20 ～ 40℃有较好的稳定性;rLac对靛类、偶氮类、三苯甲烷类等多种染料都有脱色效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林娟	福州大学生物科学与工程学院福建省海洋酶工程重点实验室	110	610	12.0	18.0
2	叶秀云	福州大学生物科学与工程学院福建省海洋酶工程重点实验室	92	537	11.0	17.0
3	郑邦晓	福州大学生物科学与工程学院福建省海洋酶工程重点实验室	1	6	1.0	1.0
4	余湘萍	福州大学生物科学与工程学院福建省海洋酶工程重点实验室	1	6	1.0	1.0
5	杨捷	福州大学生物科学与工程学院福建省海洋酶工程重点实验室	17	34	4.0	5.0