毛栓菌漆酶基因克隆及其酵母表达载体的构建

• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 毛栓菌 漆酶基因 克隆 表达载体构建
• 年，卷（期）: 2009,（27）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 12975-12977,13110
• 页数: 4页
• 分类号: S188
• 字数: 3093字
• 语种: 中文

摘要

[目的]研究毛栓菌漆酶基因克隆及其酵母表达载体的构建,为研制高品质酶制剂,实现其工业化生产和规模化应用奠定了基础.[方法]以毛栓菌总RNA为模板,通过RT-PCR克隆去信号肽的漆酶基因;通过BLAST比对,对毛栓菌漆酶基因序列的同源性进行分析;对质粒pPIC9K进行EcoR Ⅰ和Not Ⅰ进行酶切,构建其酵母表达载体p9K+Lac.[结果]去信号肽的漆酶基因编码框全长为1 512 bp,编码506个氨基酸,分子量为54 KDa;毛栓菌漆酶基因与NCBI中提交的毛栓菌基因序列同源性达到了99%.[结论]通过RT-PCR得到了漆酶基因全长,重组毕赤酵母表达载体p9K+Lac的构建是完全正确的.