鹅肌球蛋白重链1基因MyHC1全长cDNA克隆、序列及胚胎期表达特征分析

• 作者: 吴小娟 李艳艳 石亦静 邵芳 郁建锋 顾志良
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 鹅 肌球蛋白重链1(MyHC1) 胚胎期 组织表达分析
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 359-368
• 页数: 10页
• 字数: 5696字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.03.010

摘要

肌球蛋白是组成肌原纤维粗丝的主要成分,在肌肉生长发育和运动收缩过程起重要作用.本研究采用反转录PCR和快速扩增cDNA末端(rapid amplification cDNA ends,RACE)方法,从太湖鹅(Anser anser)肌肉中克隆到肌球蛋白重链1基因(myosin heavy chain 1,MyHC1)的全长cDNA,并运用生物信息学的方法对其进行分析,实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)检测MyHC1基因在鹅胚胎期的表达情况.研究结果表明,鹅MyHC1基因(GenBank登录号:KM675469)cDNA全长6028 bp,包含5 823 bp的开放性阅读框,57 bp的5'端非编码区和148 bp的3'端非编码区,共编码1 940个氨基酸.经预测,鹅MyHC1基因编码的蛋白质由31 478个原子组成,分子式为C9746H15817N2753O3096S66,相对分子质量为223kD,等电点为5.62,平均亲水性为-0.786,属于不稳定亲水蛋白.在线预测鹅和鸡(Gallus gallus)的MyHC1蛋白质三维结构呈高度相似,由多螺旋和折叠片聚集成球状头部,并带有长纤维状α-螺旋尾部.鹅MyHC1的编码区(coding sequence,CDS)序列与鸡的同源性最高,为92.86％,与哺乳类同源性多数在84％左右,与两栖类同源性相对较低.鹅与鸡氨基酸同源性最高,为96.45％,与哺乳类的同源性多数在90％左右,与非洲爪蛙(Xenopus laevis)同源性较低,为78.13％.系统进化树分析表明,哺乳动物形成一个大分支,两栖类自成一支,鹅和红原鸡聚成一支,分子进化地位的关系最近,验证了鹅和鸡属于近缘物种.qRT-PCR检测到MyHC1基因在胚胎期第7天开始表达,以后表达量逐渐升高,在15d表达量达到高峰后下降,25 d之后逐渐趋于平稳,表明,MyHC1基因在鹅胚胎期mRNA水平的表达量呈先上升再下降的趋势.本研究首次获得了鹅MyHC1的全长cDNA序列、分子的结构特点和表达特征,显示该基因在鹅肌肉生长发育过程起重要作用,为该基因的功能及鹅肉质性状研究提供了基础资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵芳	南京医科大学附属常州市第二人民医院肿瘤科	9	13	2.0	3.0
2	李艳艳	苏州大学基础医学与生物科学学院	4	11	2.0	3.0
6	顾志良	常熟理工学院生物与食品工程学院	65	234	8.0	12.0
7	郁建锋	常熟理工学院生物与食品工程学院	53	317	10.0	15.0
8	石亦静	常熟理工学院生物与食品工程学院	2	11	2.0	2.0
9	吴小娟	常熟理工学院生物与食品工程学院	2	11	2.0	2.0