C3G基因对H9C2心肌细胞凋亡和增殖的影响

• 作者: 张志升 张蕾 扶艳波 李刚 杨东艳 胡苏蕾
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: C3G 心肌细胞 凋亡 增殖 P-ERK1/2蛋白 bcl-2相关X蛋白质
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 603-609
• 分类号: R541.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2015.08.01

摘要

目的 探讨C3G基因对H9C2心肌细胞凋亡、增殖的影响及其机制.方法 构建RNA干扰慢病毒,购买pCXN2-Flag空质粒和pCXN2-Flag-hC3G过表达人C3G mRNA质粒.分别用空白试剂、阴性慢病毒、C3G siRNA慢病毒、C3G siRNA慢病毒+空质粒、C3G siRNA慢病毒+hC3G质粒随机感染和转染H9C2心肌细胞,实验被随机分为5个组,即空白对照组、阴性对照组、沉默C3G组、沉默C3G+空质粒组和沉默C3G+过表达人C3G组.转染质粒72h后,采用RTPCR法检测目的基因C3G mRNA的表达,流式细胞术检测H9C2心肌细胞的凋亡情况,MTT比色法测定细胞增殖率,Western blotting检测细胞C3G、p-ERK1/2、Bax及Flag的蛋白表达水平.结果 阴性对照组和沉默C3G组经嘌呤霉素筛选,85％以上细胞被绿色荧光蛋白标记,提示细胞被慢病毒感染.与空白对照组和阴性对照组比较,沉默C3G组和沉默C3G+空质粒组的细胞中Bax蛋白表达水平和细胞凋亡率均明显增加(P＜0.01,P＜0.05),且这两组细胞C3G mRNA、C3G蛋白、p-ERK1/2蛋白的表达水平和细胞增殖率均明显降低(P＜0.01,P＜0.05);与沉默C3G组和沉默C3G+空质粒组比较,沉默C3G+过表达人C3G组的细胞中Bax蛋白表达水平和细胞凋亡率明显降低(P＜0.01,P＜0.05),且细胞中C3GmRNA、C3G蛋白、p-ERK1/2蛋白的表达水平和细胞增殖率则明显增加(P＜0.01,P＜0.05).结论 沉默C3G基因能有效抑制细胞的增殖,促进H9C2心肌细胞凋亡;过表达C3G基因能逆转沉默C3G基因对H9C2心肌细胞的影响,表现为细胞凋亡减少,增殖明显,其机制可能与C3G基因对p-ERK1/2蛋白和促凋亡分子Bax的调控有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨东艳	重庆重庆医科大学附属第一医院老年病科	1	5	1.0	1.0
2	李刚	重庆重庆医科大学附属第一医院老年病科	1	5	1.0	1.0
3	张蕾	重庆重庆医科大学附属第一医院老年病科	1	5	1.0	1.0
4	张志升	重庆重庆医科大学附属第一医院老年病科	1	5	1.0	1.0
5	扶艳波	重庆重庆医科大学附属第一医院老年病科	1	5	1.0	1.0
6	胡苏蕾	重庆重庆医科大学附属第一医院老年病科	1	5	1.0	1.0