多杀性巴氏杆菌HN06株磷酸甘油酸变位酶gpmA基因的序列分析及其原核表达

• 作者: 吴斌 孔汉金 曾东柱 李慧 郭锐
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 多杀性巴氏杆菌 磷酸甘油酸变位酶 gpmA基因 原核表达 纯化 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 57-60
• 页数: 4页
• 分类号: S852.612
• 语种: 中文

摘要

为探索糖酵解关键酶磷酸甘油酸变位酶的功能,采用PCR方法从多杀性巴氏杆菌HN06株中扩增出了磷酸甘油酸变位酶基因gpmA,将其克隆到表达载体pET 30a(+)中,测序验证后转入表达菌株大肠杆菌BL21中进行IPTG诱导表达.结果显示,重组菌可表达出分子质量约为32 ku的重组融合蛋白,在终浓度为20 mmol/L IPTG诱导3h的情况下表达良好.表达的蛋白以可溶性蛋白的形式存在于菌体中.表达产物经Ni柱纯化后可得到纯度较高的目的蛋白.经过Western-blot分析,所纯化的蛋白能与抗多杀性巴氏杆菌HN06株阳性血清进行特异性的免疫印迹反应,证实表达的蛋白具有良好的反应原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴斌		104	1687	21.0	36.0
2	郭锐		8	6	2.0	2.0
3	李慧		33	603	11.0	24.0
4	曾东柱		1	0	0.0	0.0
5	孔汉金		1	0	0.0	0.0